活细胞收货指南

活细胞收货指南：

查  验 —— 名称&破损 
收到细胞后请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致，检查细胞瓶有无破损或漏液等异常情况。
处  理 —— 静置拍照
打开包装后，将细胞瓶外包装喷洒酒精，再拿到细胞间；在细胞间内用75%酒精消毒，在超净工作台内将瓶口的封口膜拆掉后，将细胞放入37℃ CO₂ 培养箱中静置2-4小时 (贴壁细胞在运输过程中发生细胞脱落，这是正常现象),待细胞稳定后再做后续处理；显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存，前三天照片为重要售后依据，如出现污染，请标明污染类型及相应证据(如细胞照片、判断依据等)并在收到之日起三天内与我们联系。
贴壁细胞：
细胞密度未超过80%时，将细胞瓶内的完全培养基收集至离心管中，留5mL 完全培养基，继续放入37℃  CO₂ 培养箱中培养；细胞密度超过80%时，根据情况选择传代或冻存。
注意：传代后避免频繁开关培养箱或移动培养瓶，这些操作均会影响细胞的贴壁， 一般传代12小时后再行观察。
悬浮细胞 ：  悬浮细胞稳定2-4小时后将细胞悬液收集至离心管内离心，离心后上清(完全培养基)可收集至离心管中， 沉淀制备成细胞悬液接种至新的细胞瓶中，补进适量完全培养基继续培养即可。
待细胞密度超过80%时，可进行传代，传代方法可选择“半换法”或“离心法”。
半换法：直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀后按比例移入新的培养瓶中培养。
离心法：将细胞瓶内的细胞悬液收集至离心管中进行离心，离心后去上清，沉淀制备成细胞悬液吹打均匀后 接种至新的培养瓶中培养。
冻  存—— 离心收集细胞后，加入适量冻存液，使细胞密度达到1×10/mL, 轻轻混匀，将冻存管放入程序降温盒并置于-80℃冰箱，24小时后将冻存管转入液氮长期保存。
冻存液配方：70%完全培养液+20% FBS+10%DMSO 。