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血清保存与解冻

发布时间:2020-12-08 07:50:55 点击:
保存血清最好的方法?
 
我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。需要长期保存的血清必须储存于-20℃至–70℃低温冰箱中。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
如何解冻血清才不会使产品质量受损?
我们建议您采用逐步解冻法:将-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清取出后先置于2℃-8℃冰箱中使之融解,然后移入室温待全部溶解后再分装。在溶解过程中需轻轻规则地摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
尽量避免沉淀物的产生的方法:
①解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),非常容易产生沉淀物。 
②解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 
③请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。 
④血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 
⑤若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
 
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
 
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
血清是否一定要灭活?
经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。
经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误认为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此建议若非必须,可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省宝贵的时间,更确保血清的质量!
 
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