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FuturePAGE蛋白预制胶使用常见问题及解答

发布时间:2025-10-27 15:29:54 点击:

FuturePAGE预制胶基本参数信息

胶板尺寸:约10×8cm,厚4.5mm

凝胶尺寸:约8.5×7cm,厚1.0mm

上样孔数:10孔、 12孔、15孔

推荐上样量:

10孔胶每孔最大上样量为70μl,推荐上样量35μl以下

12孔胶每孔最大上样量为50μl,推荐上样量25μl以下

15孔胶每孔最大上样量为30μl,推荐上样量15μl以下

电泳体系:Bis-Tris 凝胶缓冲系统

电泳缓冲液:Mops Running Buffer(货号:BR0001-02,务必使用配套缓冲液)

凝胶浓度:固定浓度胶:8%、10%、12%;梯度胶:4-12%、4-20%

推荐电泳条件:电压不要超过180V,建议方案160V,45-50min

兼容主流mini电泳槽:Bio-Rad、天能、六一、WIX、君意东方等

保存条件:2-8℃保存 1年
 

FuturePAGE预制胶分离范围示意图

 

注意:

以上分离范围是MOPS的运行缓冲液的分离范围。

如果使用预制胶进行WB实验,推荐使用梯度胶:

①梯度胶转印时,大分子量蛋白停留在低浓度部分,较大程度上减少残留条带;

②梯度凝胶分离范围广,大、小分子量蛋白可以跑在同一块凝胶上;

③固定浓度胶可以对窄范围的条带做精细的分辨。
 

FuturePAGE预制胶使用方法说明:
 

使用顺序:

注意:

①使用前先撕去底部金色胶条,再拔掉梳子,顺序不能颠倒;

②如果电泳槽密封胶条顶部凸起,需要将胶条取出、翻转,将其平坦的一面朝外并重新插回内框架的凹槽中;

③请使用配套的MOPS-SDS Running Buffer电泳液。蛋白电泳实验前,需检查是否漏液:内槽电泳液加满后,观察两分钟,看是否有缓冲液流出;

④蛋白电泳时,胶板和卡板需要卡到底,避免漏液;

⑤配好的电泳液,外槽可以重复使用,使用次数建议不超过3次;内槽建议尽量使用新鲜电泳液;

⑥不同样品的蛋白上样量存在差异,纯蛋白推荐上样量0.1-2ug,总蛋白推荐上样量10-15ug;

⑦建议不同上样孔之间上样量差异不要过大。


FuturePAGE预制胶常见问题解答
 

1.电泳仪报错/条带跑不下来

原因及解决方案:

底部胶条没有撕下来

 

2.marker、样品跑没了

原因及解决方案:

电极插反

 

3.条带出现弧度

原因及解决方案:

安装问题致使内槽漏液,可检查密封圈是否安装正确;同时安装2块预制胶,是否出现一高一低,是否出现歪斜。

 

4.条带迁移异常

原因及解决方案:

使用了错误的缓冲液,建议使用配套的Mops缓冲液。

 

5.梳齿明显萎缩、胶体出现气泡

原因及解决方案:

胶体冻伤,请置于2-8℃保存。保证冰箱或者冷库的温度,避免放置于出风口等温度不均匀区域。

 

6.WB背景深

原因及解决方案:

封闭和洗膜时,膜片充分浸透液体,尽量不要多张叠加。清洗海绵之后,用纯水泡过夜,充分洗净海绵。

 

7.条带双耳

原因及解决方案:

样品粘稠,提取时可加入核酸酶或者低温超声处理。

 

 

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