IP专用纳米二抗---高效消除轻重链干扰
发布时间:2024-11-20 14:24:12 点击:
Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)是新一代IP专用纳米二抗。IP专用纳米二抗只识别构象型IgG, 从而避开传统方法中抗体轻、重链的干扰。
免疫沉淀 (Immunoprecipitation,IP) 是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白常用的一种实验方法。抗体与目的蛋白结合后,再与ProteinA/G偶联的Agarose或Sepharose珠子孵育,进而分离得到珠子-ProteinA/G-抗体-目的蛋白复合物,随后可通过WB实验检测目的蛋白及与目的蛋白相互作用的其他蛋白或蛋白复合体。

然而在免疫沉淀和免疫共沉淀(co-IP) 实验中,常常因为一抗的限制,IP和WB的操作过程中不得不用到同种一抗或同种属来源的一抗。这种情况下,如果使用常规的抗种属IgG酶标二抗,WB实验中将检测到IP抗体变性后产生的重链(约55kDa)和轻链(约25kDa)。由于IP时使用的抗体量往往比WB检测时抗体使用量大非常多,此时非特异的信号往往会部分甚至完全掩盖目的蛋白的信号,尤其是轻重链附近的条带,极大地影响实验结果的准确性。
如何避免IP检测过程中轻、重链的干扰,研究人员们经过长时间的摸索,总结了如下三条经验可供大家参考:
WB检测时选择和IP时不同种属的一抗,避免IP一抗的影响。

通过使用不同种属来源抗体,WB 检测时可以有效避免重链轻链信号的影响。但如果市面上一抗没有多种种属来源可供选择,将极大的限制实验开展;同时,同类抗体需要不同种属来源大大增加项目支出成本。
方案二 Wb检测时选择只和重链或轻链反应的二抗。
为了避免轻、重链的影响,WB检测时可根据目标蛋白分子量选择只和重链或轻链反应的二抗。如果目标蛋白分子量靠近25KD,为了避免抗体轻链的干扰,选择重链特异性二抗;如果目标蛋白分子量靠近55KD,为了避免抗体重链的干扰,选择轻链特异性二抗。
为避免在实际操作过程中选择对应抗体的复杂和繁琐,现提供一种更简单有效的方案,推出特异识别鼠、兔轻链或者重链的IP后专用二抗,让轻、重链的影响不再成为IP实验的障碍。
提供以下IP专用纳米二抗产品:
Code Number |
Product Description |
Size |
prices(¥) |
001-180-005 |
Anti-Mouse&Rabbit Light chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP) |
100μL |
¥1,500.00 |
001-190-005 |
Anti-Mouse&Rabbit Heavy chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP) |
100μL |
¥1,500.00 |
方案三 识别构象型二抗
Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs®VHH(HRP) -IP专用纳米二抗是AlpVHHs推出的新一代IP专用纳米二抗。IP专用纳米二抗来检测一级抗体,只能识别天然构象的一抗,不能识别变性后的IP抗体重链和轻链,有效的避免了轻重链的干扰,让IP实验检测更准确。同时,IP专用纳米二抗保留了纳米抗体高亲和力、高结合力、极端稳定的特性,能高效快速稳定的结合目的蛋白;IP专用纳米二抗采用重组表达,产品质量稳定,极大的降低了批间差异,让实验更稳定、更简单,让您的IP实验更加放心舒心。

提供以下IP专用纳米二抗产品:
Code Number |
Product Description |
Size |
prices(¥) |
001-100-005 |
Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs®VHH(HRP) |
100μL |
¥1,600.00 |