敲除稳转株构建

敲除细胞系构建

使用CRISPR/Cas9 系统对细胞系进行基因编辑，获得目的基因被敲除的细胞系。该过程使用瞬转质粒或慢病毒法将CRISPR/Cas9 系统中的Cas9蛋白和sgRNA导入细胞中；Cas9蛋白在sgRNA的引导下切割目的基因的靶向区域；该切割产生的基因组断裂由细胞自身的基因组修复系统进行修复；由这种修复存在的不确定性产生不同种类的修复结果；通过挑取单克隆筛选到我们需要的修复结果的细胞系。